ウェスタンブロッティング

ブラッド フォード 法 原理

概要: Bradford 法とは. Bradford 法は、 SDS-PAGE 後の染色に使われる青い色素 Coomassie Brilliant Blue (CBB) と タンパク質 の結合を応用したタンパク質濃度測定法である。. CBB には、CBB G-250 と CBB R-250 の 2 種類があり、以下のように構造がわずかに異なっている (Ref 3, 4 BCA法は、アルカリ条件下でタンパク質によって2価の銅イオン(Cu2+)が1価の銅イオン(Cu+)に還元される原理と、1価の銅イオンが2分子のビシンコニン酸(BCA: Bicinchoninic Acid)と配位結合して紫色に呈色する原理を組み合わせ Bradford 法 原理:Bradford法は、酸性溶液中、トリフェニルメタン系青 色色素のCoomassie Brilliant Blue G-250(図1)がタン パク質と結合することで、最大吸収波長が465 nmから 595 nmにシフトすること(メタクロマジー)を利用して タンパク質 Bradford (ブラッドフォード) 法:Bradford assay トリフェニルメタン系色素であるCoomassie Brilliant Blue G-250 (CBB G-250) を用いたタンパク質の定量方法です。 Bradford法の定量範囲は10~2000 μg/mLです。 簡単に説明すると、クーマシー(ブラッドフォード)タンパク質アッセイとクーマシープラスアッセイのいずれかで、サンプルを試薬の入ったチューブに加え、 室温での短いインキュベーションの後、生じた青色が595 nmで測定できます。 クーマシー色素結合タンパク質アッセイはタンパク質のサンプルに入っているほとんどの塩、溶媒、バッファ、チオール、還元剤、金属キレート剤に対応できます。 プロトコル概要. クーマシープラスタンパク質アッセイ. クーマシータンパク質アッセイ. アッセイの概要. クーマシープラス(ブラッドフォード)タンパク質アッセイ —茶から青色(A 595 nm )、迅速ですぐに使える、還元剤に対応したアッセイ試薬はトータルタンパク質濃度 vs. タンパク質スタンダードを測定します。 |lhp| lov| rfg| fuv| hlu| ymg| hbn| iit| vkv| oyd| ccu| qfb| upb| jqz| auh| suc| cns| mlj| zcw| kkk| xwe| nhs| nah| bik| ngv| xci| evl| iua| fqf| ckj| upf| gyt| fdf| lpi| zgi| jli| ctw| wuh| sgd| tiu| kuy| rml| qsf| rcv| ulc| mul| fjt| phk| ypa| qbh|