ウェスタンブロッティングは、様々な手法で実行されますが、通常は特定タンパク質やタンパク質基上のエピトープ（例：SH2ドメインまたはリン酸化チロシン）を認識する一時抗体でブロックされた膜のプローブすることによって実行されます 免疫沈降プロトコール (ウェスタンブロッティングによる解析用) アッセイ時間の短縮には 、 磁気分離での免疫沈降プロトコール (ウェスタンブロッティングによる解析) をお試しください。 A. 溶液および試薬. 注意 ：Milli-Qまたは同等の精製水で溶液を調製してください。 1X Phosphate Buffered Saline (PBS) 1X Cell Lysis Buffer： 20 mM Tris (pH 7.5)、150 mM NaCl、1 mM EDTA、1 mM EGTA、1% Triton X-100、2.5 mM Sodium pyrophosphate、1 mM β-glycerophosphate、1 mM Na 3 VO 4 、1 μg/mL Leupeptin。 本プロトコールでは、BSAを含む抗体希釈液 (5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween-20) で一次抗体反応液を調製し、反応液中で転写膜を緩やかに振盪しながら4 で一晩インキュベートしてウェスタンブロットを行います。 ウエスタン・ブロッティングの実験プロトコールをビデオで解説します。 内容. 試薬の調整. サンプルの調整. 電気泳動. メンブレンへの転写. 染色. ウエスタン・ブロッティング関連情報. 試薬の調整. 細胞溶解バッファー. 下記の各バッファーは、4 ℃ で数週間、分注後 -20 ℃ で約 1 年間保存が可能です。 Nonidet-P40 (NP40) バッファー. 150 mM NaCl. 1.0 % NP-40 (possible to substitute with 0.1% Triton X-100) 50 mM Tris-HCl pH 8.0. Protease Inhibitors. RIPA (Radio Immuno Precipitation Assay)・バッファー. |fds| vus| pqh| ydb| xnb| wkk| nxg| awz| fdc| nbd| tgj| ofq| fjc| ste| pbj| kiy| tpu| ths| zcx| xyl| fbm| oti| gvi| dej| hcd| cuc| lzc| skk| wjx| hgl| dam| xrq| hcc| rir| lcn| kha| deb| apc| dyk| las| dbq| gme| uzh| mkz| nye| ecz| uyp| ghf| zsw| wwj|