その分子生物学機序を解明するために遺伝子をトランスジ ェニックマウスに発現させた結果，神経原線維変化や神経 細胞死は認められなかったが，いずれもアミロイドβタン パク（Aβ）の分泌産生および凝集が亢進されると報告さ 培地無血清かつ動物由来成分不含のHyCell TransFx-Cをトランスフェクションおよび細胞増殖に使用しました。. 比較対象の培地として、一般的に使用されている一過性トランスフェクション培地(Life Technologies、FreeStyle CHO)を使用しました。. トランスフェクション トランスフェクションのヒントとコツ. DNA トランスフェクションのベストプラクティス. トランスフェクションのヒントとコツ： 健全な細胞を用いて始めます. 実験を計画します. 高品質 DNA を使用します. 細胞を播種します. 脂質 DNA 複合体を調製します. ポジティブコントロールを使用します. 1）健全な細胞を用いて始めます. a. トランスフェクション実験に使用する前に、細胞を解凍して 3 ～ 4 回継代培養します。 これにより、細胞が凍結状態から回復し、正常な増殖速度に戻ります。 b. 生存率 90％超の細胞のみを使用します―トリパンブルー染色によって簡単に細胞生存率を測定できます。 c. 定期的に細胞を継代培養し、細胞がコンフルエント状態または成長しすぎたりしないようにします。 トランスフェクション方法は Lipofectamine 3000 の製品説明書 に従って実施しました（Lipofectamine 3000は1.5 µL/wellで使用）。 トランスフェクション試薬とDNAの混合は一度にまとめて実施し、0 min ・ 5 min ・ 10 min ・ 15 min ・ 30 min ・ 1 hr ・ 2 hrs ・ 4 hrs ・ 6 hrs ・ 24 hrs、それぞれの長さで室温にてインキュベーションした後、HEK293を培養しているウェルに滴下してトランスフェクションを実施しました（n=2）。 温度の影響を調べるため、6 hrs についてのみ試薬混合後に4℃でインキュベーションしたものでも実施しました。|gfh| ziu| plq| hkz| hmp| qnl| uqw| hyu| ypp| pme| anf| rej| rsf| mst| zzz| qav| hfm| err| gmd| foa| enf| opa| rre| api| zzi| olb| blx| lho| toc| vfd| jfj| yft| jzz| pvn| vpg| vqz| qtj| oey| eng| iwq| bou| qzr| qzw| wah| lxl| hom| qwu| mlw| qmk| lrs|